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Multiplicação de segmentos de
DNA
pela técnica PCR e Você Cidadania |
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Comparar o Código Genético com os
Códigos de Direito é uma atividade intelectual muito interessante, pois aquele parece
ser muito mais inteligente e perfeito que este, guardadas as diferenças de ser e dever
ser que naturalmente comportam. Enquanto os Seres Humanos no planeta Terra usam
Ordenamentos Jurídicos diferentes, baseados nos costumes, nas leis, em fundamentos
religiosos, etc., seus organismos usam um código único, que serve para Todos(as), com
pequenas variações étnicas de genótipo e/ou fenótipo. Tal deleite intelectual não é
puramente teórico, mas é sobretudo prático, como ensinam L. C. JUNQUEIRA e JOSÉ
CARNEIRO, no contexto científico da Biologia Celular e Molecular, in verbis:
"Multiplicação de segmentos de DNA pela técnica PCR
A técnica PCR (Polymerase Chain Reaction) possibilita a clonagem
de genes com enorme eficiência, em comparação com a clonagem feita através de
plasmídeos que são introduzidos em bactérias. A técnica PCR só é possível graças
às DNA-polimerases cuja atividade enzimática não é destruída por temperaturas
elevadas. Essas DNA-polimerases são extraídas de bactérias que vivem em fontes de água
quente. A enzima usualmente empregada é obtida da bactéria Thermus aquaticus
e, por isso, conhecida como Taq-polimerase.
A técnica PCR usa a Taq-polimerase para adicionar
desoxirribonucleotídeos a um pequeno segmento de DNA, ou primer, que dirige a
síntese do novo segmento de DNA sobre o molde (template) onde o
primer se localizar. Portanto, é necessário que o primer usado
se ligue especificamente à extremidade 3 do segmento de DNA que se deseja copiar, e
não se prenda a outro local.
Para facilidade de exposição, a técnica PCR pode ser dividida em
três etapas fundamentais. (1) A mistura da amostra de DNA + Taq-polimerase +
primers é submetida a uma temperatura de 92º - 94ºC, para que ocorra a
separação dos dois filamentos de DNA. (2) Abaixamento da temperatura para que os
primers se prendam às extremidades 3 de cada filamento de DNA, que têm
as seqüências necleotídicas complementares dos primers. É importante que
exista grande excesso de segmentos primers para possibilitar as numerosas
amplificações que ocorrerão nos ciclos posteriores da técnica. Nesta primeira etapa, a
polimerase adiciona nucleotídeos às extremidades 3 dos primers. À
medida que a polimerase acrescenta nucleotídeos aos primers, vai copiando os
filamentos de DNA, formando filamentos complementares a cada um deles. (3) A temperatura
é novamente elevada, causando a separação entre os filamentos de DNA novos e os
filamentos antigos, e reiniciando o ciclo, porém agora os segmentos iniciais de DNA
estão duplicados uma vez.
Em cada ciclo, o número de genes (segmentos de DNA) é duplicado e,
coo cada ciclo dura 2-3 horas, em algumas horas o DNA pode ser copiado bilhões de vezes. Além
de rápida, PCR é uma técnica tão sensível que pode amplificar o DNA de uma única
célula, como um glóbulo branco de sangue, por exemplo. Essa técnica tem
numerosas e importantes aplicações em biologia molecular, em procedimentos de
diagnóstico de diversas doenças hereditárias e em medicina forense. Ela torna possível
identificar ou inocentar um suspeito de crime pela comparação do DNA de pequenas
quantidades de sangue, esperma, ou um fio de cabelo, encontrados no local do crime, com o
DNA da pessoa suspeita." (In: BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR, Guanabara
Koogan, 1997, 6ª ed., p. 192, negrito meu)
Como exposto por L. C. JUNQUEIRA e JOSÉ CARNEIRO, a PCR é muito
importante para Você Cidadania, pois possibilita a análise - a partir de amostras muito
reduzidas (até de uma singela célula!;-) - forense, enquanto prova cível e/ou criminal.
Para concluir, vale lembrar que esta técnica foi usada no exame que
encomendei, para análise da transversão G - T no códon 157 do exon 5 do famoso,
cinematográfico e mundialmente conhecido P, o gene P53,
conforme informe de mercado da revista NEWSLAB nº 28 - www.newslab.com.br pelo laboratório GENOMIC
ENGENHARIA MOLECULAR LTDA. - www.genomic.com.br .
Biologicamente,
Carlos Perin Filho
E.T.: Sobre o assunto (e as deliciosas brigas de fato e de
direito que o envolvem, ontem, hoje e amanhã), ver também:
THE ROYAL COMMISSION ON CRIMINAL JUSTICE
The Ability to Challenge DNA Evidence - Research Study No 9
by Beverley Steventon
LONDON: HMSO, 1994
ISBN 0 11 341062 X
... e para relaxar... reassistir "GATACA" - aquele filme de
ficção científica sobre engenharia genética com Seres Humanos no planeta Terra - pois
existem músicas gigantes que Ninguém pode compor e/ou tocar sem as oportunas e adequadas
luvas...!;-)
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